Кит Альфа Элизы для выявления фактора некроза опухоли крысы

Крысиный фактор некроза опухоли α, Cachectin, TNF, TNFSF2, TNF-α ELISA KIT

Набор для иммуноферментного анализа (ИФА) крысиного фактора некроза опухоли альфа для TNF альфа, 48 лунок

Материалы, входящие в комплект

Принцип

В этом наборе ИФА используется метод сэндвич-ИФА. Микропланшет для стрипов, входящий в этот набор, предварительно покрыт антителом, специфичным к TNF-α . Стандарты или образцы добавляют в соответствующие лунки микропланшета для стрипов и объединяют со специфическим антителом. Затем в каждую лунку микропланшета для стрипов добавляют и инкубируют конъюгированное с пероксидазой хрена (HRP) антитело, специфичное к TNF-α . Свободные компоненты смываются. В каждую лунку добавляют раствор субстрата TMB. Только те лунки, которые содержат TNF-α и конъюгированное с HRP антитело к тромбомодулину, окрасятся в синий цвет, а затем станут желтыми после добавления стоп-раствора. Оптическую плотность (ОП) измеряют спектрофотометрически при длине волны 450 нм. Значение ОП пропорционально концентрации TNF-α . Вы можете рассчитать концентрацию TNF-α в образцах, сравнив ОП образцов со стандартной кривой.

Примечания:

• Храните набор при температуре 4°C после получения. Перед проведением анализа набор следует уравновесить до комнатной температуры. Удалите ненужные стрипы с планшета, покрытого антителами к TNF-α, запечатайте их в пакет с застежкой-молнией и храните при температуре 4°C.
• В концентрированном буфере для промывки могут появиться осадки. Пожалуйста, нагрейте буфер, чтобы растворить все осадки, что не повлияет на результаты.
• Для предотвращения экспериментальных ошибок следует использовать точную пипетку. Образцы следует добавлять в микропланшет менее чем за 5 минут. Если включено большое количество образцов, рекомендуется использовать многоканальную пипетку.
• Стандартная кривая должна быть включена в каждый анализ. Рекомендуются дублирующие лунки. Если значение ОП образца больше, чем в первой лунке стандартов, пожалуйста, разбавьте образец (n раз) перед анализом. При расчете исходной концентрации тромбомодулина, пожалуйста, умножьте общий коэффициент разбавления (XnX5).
• Во избежание перекрестного загрязнения герметики для микропланшетов предназначены только для одноразового использования.
• Пожалуйста, держите субстрат вдали от света.
• Все операции должны строго соответствовать инструкциям производителя. Результаты определяются с помощью ридера для микропланшетов.
• Со всеми образцами, буфером для промывки и отходами следует обращаться как с инфекционными агентами.
• Реагенты из разных партий нельзя смешивать.

Известные концентрации стандарта TNF-a и соответствующие значения ОП наносятся на график в логарифмическом масштабе (ось X) и в логарифмическом масштабе (ось Y) соответственно. Концентрация TNF-a в образце определяется путем нанесения ОП образца на ось Y. Исходная концентрация рассчитывается путем умножения на коэффициент разбавления.