Человеческий анти- набор теста ВИЧ 1&2 Elisa для вируса иммунодефицита человека

3. ПРОЦЕДУРА ПО ASSAY

• Позвольте всем компонентам достигнуть комнатную температуру перед использованием. Dilute сконцентрировал 1:20 буфера мытья с ddH2O.
• Установите 2 3 отрицательных управления позитвов и. Распределите 100μl надежного управления (HIV-1 и HIV-2) так же, как отрицательного контроля в дубликате в соответственно колодцы без разжижителя образца. Установите один пробел хорошо как управление предпосылки без добавления любой жидкости. Добавьте 50μl разжижителя образца в каждый тест хорошо, добавьте сыворотку теста 50 μl или плазма в колодцы теста смешивает тщательно.
• Установите плиту microtiter в humidified коробку и инкубируйте на 37°C на 30 MIN.
• Сбросьте решение реакции и добавьте разбавленный 350μl буфер мытья к каждому колодцу. Сбросьте буфер мытья после выдерживать для 15-30seconds. Повторите моя процедуру 5 раз и после этого переворачивающ плиту энергично для того чтобы получить всю воду вне и преграждающ оправу колодцев на бумаге вещество-поглотителя в течение нескольких секунд.
• Добавьте 100μl конъюгата энзима к каждому колодцу. Смешайте его нежно путем завихряться плита microtiter на плоском стенде на 1 MIN. Не добавьте конъюгат энзима к пустому колодцу.
• Установите плиту microtiter в humidified коробку и инкубируйте на 37°C на 30 MIN.
• Помойте каждое хорошо 5 раз путем заполнять каждый колодец с разбавленным буфером мытья 1X, тогда переворачивать плиту энергично для того чтобы получить всю воду вне и преграждать оправу колодцев на бумаге вещество-поглотителя в течение нескольких секунд.
• Добавьте 50μl решения a субстрата (субстрата HRP) к каждому колодцу, тогда добавьте 50μl решения b субстрата (TMB) к каждому колодцу. Смешайте нежно и инкубируйте на 37°C for15 MIN.
• Добавьте одно падение (50μl) решения стопа к каждому колодцу для того чтобы остановить реакцию цвета.
• Прочитайте значение OD на 450 nm/630 nm с двойным читателем фильтровальной пластинки. Вариант для чтения значения OD на 450 nm с одиночным читателем фильтровальной пластинки. (используя значение OD пустого колодца для того чтобы исправить полностью чтение OD от всех колодцев