|
Подробная информация о продукте:
|
Образец: | Сыворотка | Хранение: | 2-8℃ |
---|---|---|---|
EXP: | 24 месяца | размер: | 96 тестов/набор |
Выделить: | Анти- тест Elisa пероксидазы тиреоида,Анти- наборы теста антитела TPO,Анти- набор теста TPO Elisa |
Анти--TPO набор Elisa пероксидазы Анти--тиреоида
1. Предполагаемое использование
Immunoassay для in vitro количественного определения антител к пероксидазе тиреоида в человеческой сыворотке. Анти- определение ‐ TPO использовано как помощь в диагнозе аутоиммунных заболеваний тиреоида.
2. Сводка
3. Принцип теста
Косвенный метод, полная продолжительность assay: 70 минут.
Анти--TPO ELISA использует твердый участок, косвенный метод ELISA для обнаружения антител к TPO в процедуре по инкубации 2-шага. Прокладки microwell полистироля пре- покрытые с сильно immunoreactive человеческими антигенами TPO. Во время первого шага инкубации, анти--TPO специфические антитела, если присутствующий, будут прыгнуты к твердому участку пре-покрыли антигены TPO. Колодцы помыты для того чтобы извлечь unbound протеины сыворотки, и добавлены антитела IgG кролика анти--человеческие (анти--IgG) проспряганные к пероксидазе хрена энзима (конъюгату HRP-). Во время второго шага инкубации, эти HRP-проспряганные антитела будут прыгнуты ко всем комплексам антиген-антитела (IgG) ранее сформировали и unbound HRP-конъюгат после этого извлекается путем мыть. Решения хромогена содержа Tetramethylbenzidine (TMB) и перекись мочевины добавлены к колодцам и в присутсвии антиген-антител-анти--IgG immunocomplex (HRP), бесцветные хромогены hydrolyzed связанным конъюгатом HRP к цвета сине продукту. Голубой цвет поворачивает желтым после останавливать реакцию с масляной серной кислотой.
Количество интенсивности цвета можно измерить и оно пропорционально к количеству антитела захваченному в колодцах, и к количеству антитела в образце соответственно.
4. Материалы реагентов обеспечили
• Покрытое Microplate, 8 x 12 прокладок, 96 колодцев. Пре-покрытый с человеческим антигеном TPO.
• Калибраторы, 6 пробирок, 1 mL каждое, готовых для использования; Концентрация: 0 (a), 25 (b), 50 (c), 100 (d), 250 (e) и 500 (f) IU/mL.
• Конъюгат энзима, 1 пробирка, 11,0 mL HRP (пероксидазы хрена) обозначил кролика анти- человеческими антителами IgG (анти--IgG) в буфере Tris-NaCl содержа BSA (альбумин глупой сыворотки). Содержит 0,1% предохранителя ProClin300.
• Разжижитель сыворотки: 1 пробирка, 11mL. Содержание солей буфера и краски
• Концентрат моющего раствора, 1 пробирка, 25 ml (40X сконцентрировало), моющий раствор PBS-твена.
• Субстрат, 1 пробирка, 11ml, готовое для использования, (tetramethylbenzidine) TMB.
• Остановите решение, 1 пробирку, 6,0 ml 1 mol/l масляной серной кислоты.
• IFU, 1 экземпляр.
• Крышка плиты: 2 части.
Необходимы материалы (но не обеспеченный)
• Читатель Microplate с возможностью вещество-поглотителя длины волны 450nm и 620nm.
• Шайба Microplate.
• Инкубатор.
• Шейкер плиты.
• Микропипетки и multichannel микропипетки поставляя 50µl с точностью лучше чем 1,5%.
• Бумага вещество-поглотителя.
• Дистиллированная вода
5. Методика проверки
• Используйте только число требуемых колодцев и форматируйте колодцы microplate для каждых калибратора и образца, который нужно assayed.
• Добавьте µL 100 калибраторов к каждому колодцу.
• Добавьте µL 100 разжижителя образца (зеленого цвета) к каждому колодцу за исключением Калибратор-колодцев.
• Добавьте µL 10 образца к каждому колодцу разжижителя образца (ПРИМЕЧАНИЮ: Реагенты в Wells повернут голубой цвет от зеленого цвета), тогда трясут 30 секунд.
• Покройте плиту с крышкой плиты и инкубируйте на °C 37 на 30 минут.
• Сбросьте содержание микро- плиты декантированием или устремленностью. Если сцеживающ, выстучайте и закрывайте сухой плиты с бумагой вещество-поглотителя.
• Добавьте µL 350 моющего раствора, сцедите (кран и помарка) или аспирируйте. Повторите 4 дополнительных времени для итога 5 мыть. В конце стирки, переверните плиту и выстучайте вне любой остаточный моющий раствор на бумагу вещество-поглотителя.
• Добавьте µL 100 конъюгата энзима,
• Покройте плиту с крышкой плиты и инкубируйте на °C 37 на 30 минут.
• Добавьте µL 350 моющего раствора, сцедите (кран и помарка) или аспирируйте. Повторите 4 дополнительных времени для итога 5 мыть. В конце стирки, переверните плиту и выстучайте вне любой остаточный моющий раствор на бумагу вещество-поглотителя.
• Добавьте µL 100 субстрата к каждому колодцу. Покройте и инкубируйте на температуре окружающей среды (18-25℃) в темноте для реакции на 10 минут. Не трясите плиту после добавления подсостояния.
• Добавьте µL 50 решения стопа к каждому колодцу.
• Трясите на 15-20 секунд для того чтобы смешать жидкость внутри колодцы. Важно обеспечить что голубые изменения цвета, который нужно пожелтеть совершенно.
• Прочитайте absorbance каждого колодца на 450 nm (используя 620 до 630 nm как длина волны ссылки для того чтобы уменьшить хорошие несовершенства) в микро- читателе плиты. Результаты должны быть прочитаны не позднее 30 минут добавления останавливают решение.
Контактное лицо: Mr. Steven
Телефон: +8618600464506