Человеческий набор Thrombomodulin TM Fetomodulin CD141 THBD THRM ELISA

Человеческое thrombomodulin, TM, Fetomodulin, CD141, THBD, набор THRM ELISA для пользы исследования

Человеческое thrombomodulin, TM, Fetomodulin, CD141, THBD, набор THRM ELISA

Материалы обеспеченные с набором

Принцип

Этот набор ELISA использует сэндвич-ELISA как метод. Stripplate Microelisa обеспеченное в этом наборе былопокрыто с антителом специфическим к thrombomodulin. Стандарты или образцы добавлены к соотвествующим колодцам stripplate Microelisa и совместили к специфическому антителу. После этого пероксидаза хрена (HRP) - проспряганное антитело специфическое для thrombomodulin добавлена к каждому stripplate Microelisa хорошо и инкубирована. Свободные компоненты помыты прочь. Решение субстрата TMB добавлено к каждому колодцу. Только те колодцы которые содержат thrombomodulin и HRP проспрягали антитело thrombomodulin покажутся голубыми в цвете и после этого повернутся желтым после добавления решения стопа. Оптически плотность (OD) измерена спектрофотометрически на длине волны 450 nm. Значение OD пропорционально к концентрации thrombomodulin. Вы можете высчитать концентрацию thrombomodulin в образцах путем сравнивать OD образцов к стандартной кривой.

Подготовка образца

1. подготовка сыворотки

После собрания всей крови, позвольте крови свернуться путем выходить она непотревоженный на комнатной температуре. Это обычно требует 10-20 минут. Извлеките сгусток крови путем центрифуговать на 2,000-3,000 rpm на 20 минут. Если преципитаты появляются во время резервирования, то образец должен быть centrifugated снова.

2. подготовка плазмы

Соберите всю кровь в трубки с противокоагулятором (ЭТИЛЕНДИАМИНТЕТРАЦЕТАТ или цитрат). После инкубированный на комнатной температуре на 10-20 минут, трубки centrifugated на минута 20 на 2,000-3,000 rpm. Соберите супернатант осторожно как образцы плазмы. Если преципитаты появляются во время резервирования, то образец должен быть centrifugated снова.

3. Пробы мочи

Соберите мочу в безгнилостные трубки. Соберите супернатант осторожно после центрифуговать на минута 20 на 2,000-3,000 rpm. Если преципитаты появляются во время резервирования, то образец должен быть centrifugated снова. Процедура по подготовки спинномозговой жидкости и pleuroperitoneal жидкости это же как эта из пробы мочи.

4. Образцы клетки

Если вы хотите обнаруживать секретирования клеток, то соберите супернатант культуры в безгнилостные трубки. Соберите супернатант осторожно после центрифуговать на минута 20 на 2,000-3,000 rpm. Если вы хотите обнаруживать внутриклеточные компоненты, то разбавьте клетки к 1X106/ml с PBS (пэ-аш 7.2-7.4). Клетки были разрушены для того чтобы выпустить внутриклеточные компоненты повторенный замерзать и таять. Соберите супернатант осторожно после центрифуговать на минута 20 на 2,000-3,000 rpm. Если преципитаты появляются во время резервирования, то образец должен быть centrifugated снова.

5. образцы ткани

Образцы ткани отрезаны, весить, замерзаны в жидком азоте и сохранены на -80℃ для использования в будущем. Образцы ткани были гомогенизированы после добавления PBS (пэ-аш 7,4). Образцы следует эксплуатирова на 4℃. Соберите супернатант осторожно после центрифуговать на минута 20 на 2,000-3,000 rpm. Аликвот супернатант для assay и использования в будущем ELISA.

Примечания:

• Извлечение образца и assay ELISA должны быть выполнены как можно скорее после собрания образца. Образцы должны быть извлечены согласно уместной литературе. Если assay ELISA нельзя выполнить немедленно, то образцы можно хранить на циклах замораживани-таяния -20℃.Repeated следует избежать.
• Наши наборы нельзя использовать для образцов с NaN3 которое может заблокировать работу HRP.