Набор мыши IL2R CD25 IL2-RA ELISA альфы субблока приемного устройства Interleukin-2

Альфа субблока приемного устройства мыши Interleukin-2; IL2R; CD25; Набор IL2-RA ELISA

Материалы обеспеченные с набором

Требования к образца

• свертывание сыворотки на комнатной температуре 10-20 минут, минута центрифугирования 20 на скорости 2000-3000 r.p.m извлекает супернатант, если высыпание появилось, то центробежный снова.
• плазма одетая плазм-пользой ЭТИЛЕНДИАМИНТЕТРАЦЕТАТА или цитрата как противокоагулятор, смешивание 10-20 минут, минута центрифугирования 20 на скорости 2000-3000 r.p.m извлекает супернатант, если высыпание появилось, то центробежный снова.
• Моч-соберите для того чтобы посудить стерильный контейнер, центрифугирование 20 минута на скорости 2000-3000 r.p.m извлекает супернатант, если высыпание появилось, то центробежный опять. Деятельность Hydrothorax и спинномозговая жидкая ссылка на ее.
• культура клетки супернатант-обнаружить выделительные компоненты, собрать для того чтобы посудить стерильный контейнер, минуту центрифугирования 20 на скорости 2000-3000 r.p.m для того чтобы извлечь супернатант, обнаружить состав клеток, подвес с PBS (PH7.2-7.4), концентрацию клетки Dilut клетки достигла 1 миллион/ml, повторенные циклы замораживани-таяния, клетки повреждения и отпуск внутриклеточных компонентов, минута центрифугирования 20 на скорости 2000-3000 r.p.m извлекает супернатант, если высыпание появилось, то центробежный снова.
• Образцы ткани после резать образцы, проверяют вес, добавляют PBS (PH7.2-7.4), быстро, который замерли с жидким азотом, поддерживают образцы на 2-8℃ после плавить, добавляют PBS (PH7.4), гомогенизированное вручную или точильщики, минута центрифугирования 20 на скорости 2000-3000 r.p.m извлекают супернатант.
• извлеките как можно скорее после собрания образца, и согласно уместной литературе, и быть экспериментом как можно скорее после извлечения. Если оно не может, то образец можно держать в ℃ -20 для сохранения, Avoid повторил циклы замораживани-таяния.
• Не смогите обнаружить образец которые содержат NaN3, потому что NaN3 блокирует HRP активное.

Принцип

Этот набор ELISA использует сэндвич-ELISA как метод. Stripplate Microelisa обеспеченное в этом наборе былопокрыто с антителом специфическим к IL2R. Стандарты или образцы добавлены к соотвествующим колодцам stripplate Microelisa и совместили к специфическому антителу. После этого пероксидаза хрена (HRP) - проспряганное антитело специфическое для IL2R добавлена к каждому stripplate Microelisa хорошо и инкубирована. Свободные компоненты помыты прочь. Решение субстрата TMB добавлено к каждому колодцу. Только те колодцы которые содержат IL2R и HRP проспрягали антитело thrombomodulin покажутся голубыми в цвете и после этого повернутся желтым после добавления решения стопа. Оптически плотность (OD) измерена спектрофотометрически на длине волны 450 nm. Значение OD пропорционально к концентрации IL2R. Вы можете высчитать концентрацию IL2R в образцах путем сравнивать OD образцов к стандартной кривой.

Примечания:

• Храните набор на 4°C на получении. Набор должен быть эквилибрирован к комнатной температуре перед assay. Извлеките все ненужные прокладки из IL2R Антител-покрыл плиту, заново герметизируйте их в zip-lock фольге и сдержите на 4°C.
• Преципитаты могут появиться в сконцентрированный моя буфер. Пожалуйста нагрейте буфер для того чтобы растворить все преципитаты, которые не повлияют на результаты.
• Точная пипетка должна быть использована для избежания экспириментально ошибки. Образцы должны быть добавлены к Microplate в меньше чем 5 минутах. Если большое количество образцов включены, то пипетка множественного канала порекомендована.
• Стандартная кривая должна быть включена в каждом assay. Колодцы копии порекомендованы. Если значение OD образца больше чем первый колодец стандартов, то пожалуйста разбавьте образец (времена n) перед тестом. Высчитывая первоначальную концентрацию thrombomodulin, пожалуйста умножьте полный множитель дилюции (XnX5).
• Во избежание взаимн загрязнение, уплотнители Microplate для бывшей пользы только.
• Пожалуйста держите субстрат далеко от света.
• Полностью деятельность должна быть соответствием с инструкциями изготовителя строго. Результаты определенные читателем плиты Microtiter.
• Все образцы, моя буфер и отходы должны быть обработаны как заразные агенты.
• Реагенты от различных серий не должны быть смешаны.