Комплект тестов TNF-α Elisa для человека

Предназначенное применение

Этот комплект используется для определения концентрации ТНФ-α в культурах клеток человека.

Процедура оценки

1Разбавлять и добавлять образец:Разбавлять первоначальную плотность Стандарт по нижней таблице: 400ng/L 5 Standard 150μl Original density Standard+150μl Standard diluent 200ng/L 4 Standard 150μl 5 Standard+150μl Standard diluent 100ng/L 3 Standard 150μl 4 Standard+150μl Standard diluent 50ng/L 2 Standard 150μl 3 Standard +150μl Standard diluent 25ng/L 1 Standard 150μl 2 Standard +150μl Standard diluent

2.добавлять образец: устанавливать пустые колодцы отдельно (пустые сравнительные колодцы не добавляют образец и реагент HRP-Conjugate, иначе каждая стадия операции одинакова).Добавить 50μl стандартного в Microelisa стрипплетДобавьте 40 мкл разбавленного образца к пробы, затем добавьте 10 мкл пробы (конечная разбавленность пробы составляет 5 раз), добавьте пробу к пробе, не прикасайтесь к стенке, насколько это возможно, и мягко перемешайте.

3.Инкубировать: после закрытия пластины мембраной закрытия пластины инкубировать в течение 30 минут при температуре 37°C.

4.Конфигурировать жидкость: 30-кратный (или 20-кратный) раствор для промывки, разбавленный 30-кратным (или 20-кратным) разведением с водой и резервом.

5.мытье: раскрыть закрывающую мембрану, выбросить жидкость, высушить по поводу, добавить стиральный буфер на каждое колодец, стоять в течение 30 секунд, затем слить, повторить 5 раз, высушить по повороту.

6.добавление фермента:добавление реактива HRP-Conjugate 50μl в каждую бутылку, кроме пустой бутылки.

7. инкубировать: Операция с 3.

8.мытье: работа с 5.

9.окрас:добавлять хромогенный раствор A 50ul и хромогенный раствор B 50ul в каждую вал, избегать консервирования светом в течение 10 минут при 37°C

10.Остановить реакцию: Добавить Stop Solution50μl к каждому велу, остановить реакцию ((синий цвет меняется на желтый цвет).

11.анализ:принимать пустое вещество в виде нуля, читать поглощение при 450 нм после добавления стоп раствора и в течение 15 мин.

Требования к образцам

1. извлекать как можно скорее после сбора образца и в соответствии с соответствующей литературой, а также проводить эксперименты как можно скорее после извлечения.1 образец может храниться при температуре 20 °C для сохраненияИзбегайте повторных циклов заморозки и размораживания.

2Невозможно обнаружить образцы, содержащие NaN3, потому что NaN3 ингибирует HRP актив.

Важные замечания

1. Комплект выносится из холодильной среды должен быть сбалансирован в течение 15-30 минут при комнатной температуре, пластинки ELISA покрыты, если не использовались после открытия,Пластинку следует хранить в запечатанном мешке..

2. промывка буфер будет кристаллизации отделения, он может быть нагрет вода помогает раствориться при разведении.

3. добавить Образец с пробиркой Каждый шаг, и корректировать его точность часто, избегает экспериментальной ошибки. добавить образец в течение 5 мин, если количество образцов много, рекомендую использовать Voley.

4Если содержание испытываемого материала чрезмерно высокое (ОД образца больше, чем первая стандартная величина), пожалуйста, разбавьте Образец (n-кратный), пожалуйста, разбавьте и умножьте на коэффициент разбавления.(×n×5).

5Замыкательная плита мембраны ограничивает только одноразовое использование, чтобы избежать перекрестного загрязнения.

6Подложка избегает сохранения света.

7Пожалуйста, строго следуйте инструкции по применению, для определения результатов испытаний необходимо использовать микротитровый числитель пластинки в качестве стандарта.

8. Пробы, стиральный буфер и каждый вид отходов должны быть в соответствии с инфекционным материалом процесса.

9Не смешивайте реагенты с теми из других партий.