Наименование продукта

Набор RT-PCR для обнаружения ВГС (вируса гепатита D) в режиме реального времени

Предназначенное использование

Дляin vitro качественное выявление РНК ВГВпредназначены длядиагностика, мониторинг и количественное определение вирусной нагрузкиВирус гепатита D.

Технические параметры:

Принцип испытания

• RT-PCR в реальном времени: Целью является сохраненный регионГеном ВГВ(например,R0илиHDAgгенов)специальные для последовательности праймеры и зонды TaqMan(например, с маркировкой FAM).

• Высокая чувствительность и специфичность: Нет перекрестной реакции с ВГБ, ВГК или другими вирусами гепатита.

• Внутренний контроль (IC): Включается для мониторинга экстракции РНК и ингибирования ПЦР (например, RNase P или синтетическая РНК).

Компоненты комплекта

1. RT-PCR мастер-микс: Содержитобратная транскриптаза, полимераза Taq горячего запуска, dNTP и оптимизированный буфер.

2. Смесь грунтовщика/пробы: Олигонуклеотиды, специфические для HDV, с флуоресцентным зондом (например, FAM для HDV, HEX/VIC для IC).

3. Контроль:

   • Положительный контроль: Синтетическая РНК HDV или инактивированный вирус.

   • Отрицательный контрольВода без нуклеазы.

   • Внутренний контроль(если включено).

4. Другие реагенты: Вода без DNase/RNase, реакционные трубки (при наличии).

Рабочий процесс

1. Подготовка образца: Экстракция вирусной РНК (совместима сQIAamp, MagMAX или автоматизированные системы)).

2. Настройка ПЦР: Смешать экстрагированную РНК с мастер-смесью и праймерами/зондами.

3. Усиление:

   • Обратная транскрипция: 50°C в течение 10−15 мин.

   • Активация ПЦР: 95°C в течение 2°5 мин.

   • Велосипед: 40 45 циклов 95°C (10 сек) → 60°C (30 60 сек, показание флуоресценции).

4. Анализ:

   • Количественный: Стандартная кривая вирусной нагрузки (МЕ/мл или копии/мл).

   • Качественный: Крайние значения Ct для положительных/отрицательных результатов.

Характеристики производительности

• Чувствительность:≤ 10−50 МЕ/мл(95% LOD).

• Линейный диапазон:102 ≈ 108 МЕ/мл(количественные наборы).

• Специфика: Нет перекрестной реакции с ВГБ, ВГК, ВИЧ или другими распространенными патогенами.

• Точность: CV < 5% для внутри- и межанализационной вариативности.

•