Тест сыворотки T4 теста тироксина T4 Elisa ISO свободный 110 минут прочитанных время

Тироксин T4
REF: Тесты DS177703 96

1. Предполагаемое использование
Immunoassay для in vitro количественного определения тироксина в человеческой сыворотке.

2. Сводка
Тироксин инкрети (T4) главный продукт сделанный секретным тироидной железой и объединенный компонент системы подбугорь-anterior pituitary-тиреоида регулируя. Он имеет функцию анаболитно влиять на метаболизм. Тироксин сформирован в реакции сочетания от 2 молекул DIT (3,5-diiodotyrosine) в тироидной железе. , который хранят предел к thyroglobulin в lumina фолликулов тиреоида и сделано секретным по мере необходимости под влиянием TSH. (1, 2) большая часть (> 99%) полного тироксина (T4) в сыворотке присутствует в протеине? форма предела. По мере того как концентрация протеинов перехода в сыворотке подлежит экзогенные и эндогенные влияния, состояние связывая протеинов необходимо также учесть в оценке концентрации инкрети тиреоида в сыворотке. Если это проигнорировано, то изменения в связывая протеинах (например должный к эстрогену? содержание подготовок, во время беременности или в присутствии к nephrotic синдрому etc.) может привести к ошибочным оценкам государства тиреоида метаболически. (3, 4, 5, 6, 7) определение T4 можно использовать для следующих индикаций: обнаружение гипертиреоза, обнаружение первичного и вторичного гипотиреоза, и контроль терапии TSH-подавления. (8)
Assay T4 использует конкурсный принцип теста с антителом специфически сразу против T4. Эндогенное T4, выпущенное действием сульфоновой кислоты 8 anilino-1-naphthalene (ANS).

3. Материалы реагентов обеспечили
• Покрытое Microplate, 8 x 12 прокладок, 96 колодцев, пре-покрытых с T4 derivant.
• Калибраторы, 6 пробирок, 1 ml каждое, готовых для использования; Концентрация: 0 (a), 2,5 (b), 5 (c), 10 (d), 15 (e) и 30 (f) μg/dL.
• Конъюгат энзима, 1 пробирка, 6,0 ml HRP (пероксидазы хрена) обозначил мышь моноклональным T4 в буфере Tris-NaCl содержа BSA (альбумин глупой сыворотки). Содержит 0,2% предохранителя ProClin300. ANS 1,5 mg/mL.
• Субстрат, 1 пробирка, 11ml, готовое для использования, (tetramethylbenzidine) TMB.
• Остановите решение, 1 пробирку, 6,0 ml 1 mol/l масляной серной кислоты.
• Концентрат моющего раствора, 1 пробирка, 25 ml (40X сконцентрировало), моющий раствор PBS-твена.
• IFU, 1 экземпляр.
• Крышка плиты: 1 часть.

4. Необходимы материалы (но не обеспеченный)
• Читатель Microplate с возможностью вещество-поглотителя длины волны 450nm и 620nm.
• Шайба Microplate.
• Инкубатор.
• Шейкер плиты.
• Микропипетки и multichannel микропипетки поставляя 50μl с точностью лучше чем 1,5%.
• Бумага вещество-поглотителя.
• Дистиллированная вода

Методика проверки

Обеспечьте что образцы, калибраторы, и управления пациентов на температуре окружающей среды (℃ 18-25) перед измерением. Смешайте все реагенты через нежно переворачивать до пользы.

• Используйте только число требуемых колодцев и форматируйте колодцы microplates для каждых калибратора и образца, который нужно assayed. • Добавьте µL 50 калибраторов или образцов к каждому колодцу.

• Добавьте µL 50 конъюгата энзима к каждому колодцу.

• Трясите microplate нежно на 30 секунд для того чтобы смешать.

• Покройте плиту с крышкой плиты и инкубируйте на ℃ 37 на 60 минут.

• Сбросьте содержание микро- плиты декантированием или устремленностью. Если сцеживающ, выстучайте и закрывайте сухой плиты с бумагой вещество-поглотителя.

• Добавьте µl 350 моющего раствора, сцедите (кран и помарка) или аспирируйте. Повторите 4 дополнительных времени для итога 5 мыть. Автоматизированную шайбу прокладки microplate можно использовать. В конце стирки, переверните плиту и выстучайте вне любой остаточный моющий раствор на бумагу вещество-поглотителя.

• Добавьте µL 100 субстрата к каждому колодцу.

• Покройте и инкубируйте на температуре окружающей среды (18-25℃) в темноте для реакции на 20 минут. Не трясите плиту после добавления подсостояния. • Добавьте µL 50 решения стопа к каждому колодцу.

• Трясите на 15-20 секунд для того чтобы смешать жидкость внутри колодцы. Важно обеспечить что голубые изменения цвета, который нужно пожелтеть совершенно.

• Прочитайте absorbance каждого колодца на 450 nm (используя 620 до 630 nm как длина волны ссылки для того чтобы уменьшить хорошие несовершенства) в микро- читателе плиты. Результаты должны быть прочитаны не позднее 30 минут добавления останавливают решение