• Приготовить реагенты: развести 1 объем концентрированного стирального буфера (20×) с 19 объемами дистиллированной воды, хорошо перемешать.
• Добавьте образцы: Откройте мешок из фольги и удалите микропластинку. Установите 1 скважину в виде пустого, 2 скважины в качестве отрицательного контроля, 2 скважины в качестве положительного контроля. После распределения 50μL разбавителя образца,выделять 50μL образца или отрицательного контроля или положительного контроля в соответствующие скважиныЛегко вибрируя тарелкой.
• Инкубировать: покрыть микропластинку крышкой пластинки и инкубировать покрытую микропластинку в управляемой термостатом ванне или инкубаторе микропластинки при температуре 37°C в течение 60 минут.
• Помыть тарелку: снимите крышку тарелки. Вдыхайте содержимое всех колодцев. Наполните колодцы разбавленным стиральным буфером (на 10 ~ 20 секунд до замочивания), затем снова вдыхайте.Повторить процедуру 5 раз.Убедитесь, что объем отдыха минимален, нажав пластину на абсорбирующую бумагу.
• Добавление конъюгата: добавить 100μL конъюгата в каждую скважину (кроме пустой скважины).
• Инкубировать: покрыть микропластинку и инкубировать ее при температуре 37°C в течение 30 минут.
• Промыть тарелку: повторить процедуру мытья, как в шаге 4.
• Добавление субстрата: добавить 50μL субстрата раствора А и 50μL субстрата раствора В в каждую скважину, хорошо перемешать. покрыть и инкубировать при 37°C в течение 30 минут.
• Остановить реакцию: добавить 50μL Stop Solution в каждую скважину, хорошо перемешать.
• Прочитайте абсорбанс на 450 нм. Если используется измерение двойной длины волны, то эталонная длина волны должна быть выбрана от 620 до 690 нм.

ОБЯЗАННОСТИ

• Перед использованием все компоненты комплекта должны достичь комнатной температуры.
• Следуйте инструкции, чтобы строго контролировать температуру и время реакции.
• Не смешивайте компоненты различных номеров партий.
• Комплект должен храниться при температуре 2- 8°C. Не используйте компоненты комплекта после истечения срока годности.