Комплект испытаний ELISA на антитела (IgE)

Предназначенное применение

  Этот комплект является количественным обнаружением общего количества IgE антитела (IgE) в сыворотке/плазме человека in vitro.Общее тестирование IgE также может быть рекомендовано пациентам с подозрением на паразитарные заболевания..

Принцип испытания

  Непосредственная гиперчувствительность (аллергия I типа) проявляется в результате специфической IgE.увеличение специфического титра IgE у пациентов сопровождается увеличением общего титра IgEВ этом случае титр может вырасти до 1000 раз. В целом, международные единицы на миллилитр (МЕ/мЛ) определяются как: 1 МЕ/мЛ равно 2,4 нг IgE.Уровень IgE может достигать 50Кроме того, титры IgE повышены у пациентов с паразитарными заболеваниями.

Реагент не рекомендуется для физического обследования здоровых людей, результаты тестирования положительных или отрицательных только от имени соответствующих результатов теста на IgE антитела положительные или отрицательные,Неопределенность корреляции с пациентом болеет и может быть не единственным показателем оценки пациентов, должны быть объединены с клинической презентацией пациента и другими лабораторными исследованиями для комплексного анализа заболевания.

В этом реагенте был принят принцип двойного антителного сэндвичного иммуноанализа.Моноклональные антитела, которые распознают анти-IgE были предварительно покрыты в скважинах микропласты, и образцы сыворотки/плазмы человека и еще одно моноклональное антитело, маркированное ферментами, были добавлены в поры пластины.Оценка OD была зачислена и ее содержание было рассчитано с помощью считывателя микропластин.

Процедура испытания

1.Все реагенты должны быть оставлены на комнатной температуре в течение 15 минут до использования.

2Перед использованием разбавлять буфер для мытья с частотой разбавления 1:40 с дистиллированной водой.

3Образец должен соответствовать количеству микропластин, каждая пластинка должна быть снабжена скважинами (количество скважин определяется ссылкой и образцом, подлежащим испытанию).

Примечание: для каждого образца используйте отдельный наконечник пипеты для утилизации, с каждой ссылкой, чтобы избежать перекрестного загрязнения.

4Добавить 100μL разбавителя пробы в соответствующую скважину, добавить 20μL каждого эталонного S0, S1, S2, S3, S4, S5 и образца соответственно в соответствующую скважину.

5Осторожно встряхнуть, чтобы перемешать, инкубировать при температуре 37°C в течение 30 минут, с мембраной герметичной пластины.

6По окончании инкубации, снимите и выбросьте крышку пластины. Вытащите, добавьте буфер для мытья в каждую скважину в течение 10 секунд. Повторите 5 раз. После последнего цикла мытьяПеревернуть тарелку на бумагу или чистый полотенце, и нажмите, чтобы удалить остатки.

7. соответственно добавление конъюгата 100μL. Инкубировать при 37°C в течение 30 минут с мембраной уплотнительной пластины, уплотняющей пластину.

8Помыть тарелку как шаг 6.

9. Добавить субстрат А (50μL) и субстрат В (50μL). Легко встряхнуть, чтобы смешать. Инкубировать при 37°C в течение 10 минут с мембраной уплотнительной пластины уплотнения пластины.

10Добавьте 50 мкЛ Stop Solution в каждую скважину. Осторожно перемешайте, встряхнув, зачитайте абсорбанцию в течение 10 минут после прекращения реакции.Затем считайте значение абсорбции при 450 нм/ 630 нм с помощью микропластинки.Вычислить концентрацию и оценить результаты.