Антитела к вирусу гепатита В, основной антиген (HBcAb)

ЭЛИСА Т- Да.Кэто

Лишь для диагностики in vitro и профессионального применения.

Название продукта

Набор ELISA для анти-HBc (сыворотка/плазма)

Предназначенное применение

Этот анти- HBc тест- комплект ELISA является качественным выявлением антитела к антигену ядра вируса гепатита B (HBcAb) в сыворотке/ плазме человека.Реагент подходит для клинического скрининга и диагностики вирусной инфекции гепатита В в сыворотке/плазме человека..

Принцип испытания

Вирус гепатита В (ВГБ) - это конверт,Двухцепочечный ДНК-вирус, принадлежащий к семейству Hepadnaviridae и признанным главной причиной гепатита, передаваемого кровью, наряду с вирусом гепатита С (HCV)Инфекция с ВГБ вызывает широкий спектр клинических проявлений, начиная от легкого, не явного заболевания и заканчивая тяжелым гепатитом, тяжелыми хроническими заболеваниями печени,которые в некоторых случаях могут привести к циррозу и карциноме печениКлассификация инфекции гепатита В требует выявления нескольких серологических маркеров, выраженных в течение трех фаз (инкубационной, острой и выздоровляющей) инфекции.

Основным компонентом вируса является антиген ядра гепатита В (HBcAg).Этот антиген ядра состоит из одного полипептида примерно 17kD, который высвобождается при расщеплении частиц ядра.По крайней мере, один иммунологический детерминант присутствует в антигене.

Вскоре после возникновения HBsAg появляются антитела к HBcAg (анти- HBc общее антитело и IgM) и никогда не исчезают.инфекция гепатита В может быть заразина без иммунологически обнаруживаемых анти- HBcЭто обычно обнаруживается у пациентов с иммунодепрессией. Скрининг на анти-HBc дает данные о распространенности гепатита В в различных группах населения.хроническийВместе с другими тестами на гепатит В, выявление анти- HBc имеет жизненно важное значение при диагностике в клинической обстановке.анти-HBc-маркер позволяет правильную диагностику и надлежащий мониторинг прогрессирования вируса.Анти- HBc может быть единственным показателем инфекции гепатита В (включая другие тесты на пациентов с отрицательным показателем HBsAg).

Система испытания HBcAb ELISA основана на конкурентном принципе твердой фазы, инкубации в один этап.он конкурирует с моноклональным анти-HBc, конъюгированным с перекисистой хрящей (HRP-Conjugate) за фиксированное количество очищенного HBcAg, предварительно покрытого в микропластинкеПри отсутствии анти-HBc HRP-конъюгированный анти-HBc связывается с антигенами внутри колодцев.После добавления хромогенных растворов А и В в колодцы и во время инкубацииПосле остановки реакции с серной кислотой синий цвет становится желтым. Наличие антител к HBcAg в образце указывается низким цветом.или вообще нет цвета.

Требования к образцу

1.Коллекция образцов:Не требуется специальной подготовки пациента. Образец собирают в соответствии с обычной лабораторной практикой. Для этого анализа могут быть использованы свежие образцы сыворотки/плазмы.Кровь, собранная путем венопункции, должна быть естественно и полностью свернута сыворотка должна быть отделена от сгустка как можно раньше, чтобы избежать гемолиза красных кровяных клетокСледует следить за тем, чтобы образцы сыворотки/плазмы были прозрачными и не были загрязнены микроорганизмами.

2.HПри лечении липемии, желтухи или гемолитических заболеваний не следует использовать используетсяОни могут дать ложные результаты.Не деактивируйте при нагревании экземплярыЭто может привести к деградации целевого анализатора.

3. HBcAb ELISA предназначена только для тестирования отдельных образцов сыворотки/плазмы. Не используйте анализ для тестирования образцов трупов, слюны, мочи или других жидкостей организма, или объединенной (смешанной) крови.

4Транспортировка и хранение: хранить образцы при температуре 2-8°C. Образцы, не требуемые для анализа в течение 3 дней, должны храниться замороженными (-20°C или ниже).Для перевозки, образцы должны быть упакованы и помечены в соответствии с действующими местными и международными правилами для транспортировки клинических образцов и этиологических агентов.

Процедура испытания

1Все реагенты должны быть оставлены на комнатной температуре в течение 15 минут перед использованием.

2Перед использованием разбавлять буфер для мытья с частотой разбавления 1:40 с дистиллированной водой.

3Образец должен соответствовать количеству микропластин, каждая пластинка должна иметь 3 скважины отрицательного контроля, 2 скважины положительного контроля и 1 скважину пустого контроля.(Если обнаружить с двойной длиной волны обнаружения, установка пустого контрольного скважины не допускается).

Примечание: для каждого образца, отрицательного и положительного контроля, используйте отдельный наконечник пипеты для удаления, чтобы избежать перекрестного загрязнения.

4Добавьте 50 мкл образца в соответствующую колодец (Когда этот комплект используется для клинической вспомогательной диагностики, образец, подлежащий испытанию, должен быть разбавлен нормальным раствором солевого раствора в 1:30 для тестирования.При использовании для эпидемиологических исследований, исходный образец может быть обнаружен ), добавить 50μL отрицательного контроля и положительного контроля в скважины отрицательного контроля и скважины положительного контроля.Соответственно добавление конъюгата фермента 50μL (не добавлять в пустую скважину).

5. Встряхнуть 30 секунд с помощью осциллятора (этот шаг очень важен).

6По окончании инкубации, снимите и выбросьте крышку пластины. Вытащите, добавьте буфер для мытья в каждую скважину в течение 20 секунд. Повторите 5 раз. После последнего цикла мытьяПеревернуть тарелку на бумагу или чистый полотенце, и нажмите, чтобы удалить остатки.

7. Добавить субстрат А (50μL) и субстрат В (50μL) (не добавлять в пустую скважину). Нежно перемешивать, встряхивая. Инкубировать при 37 °C в течение 15 минут с мембраной уплотнительной пластины, уплотняющей пластину.

8Добавьте 50μL Stop Solution в каждую скважину (не добавляйте в пустую скважину).Калибровка считывателя пластины с пустотой хорошо и прочитать поглощение на 450nm.Если используется инструмент с двойным фильтром, настройка эталонной длины волны на 630 нм. Не допускается настройка пустых скважин, если для обнаружения используется двойная длина волны. Вычислить значение отсечения и оценить результаты.