Вирус денге - это флавивирус, обнаруженный в основном в тропических и субтропических районах.

В настоящее время в стране наблюдается рост заболеваемости вирусами лихорадки денге, а передача происходит через комаров, главным образом Aedes aegypti и Aedes albopictus.

Вирусы лихорадки денге, передаваемые комарами (серотип 1-4), вызывают лихорадку денге, тяжелую болезнь, похожую на грипп.

По оценкам ВОЗ, в настоящее время в развитых странах, в том числе и в США, наблюдается рост заболеваемости.

что в мире ежегодно случается от 50 до 80 миллионов случаев лихорадки денге, включая потенциально смертельную форму болезни, называемую

Первичная инфекция вирусом денге приводит к самостоятельной смерти.

Ограничивающее заболевание, характеризующееся легкой или высокой лихорадкой продолжительностью от 3 до 7 дней, сильной головной болью с болью за глазами, мышечной недостаточностью.

Вторая инфекция является наиболее распространенной формой заболевания во многих частях Юго-Востока.

Это форма заболевания более серьезная и может привести к DHF и DSS.

Это может включать высокую лихорадку, кровотечение и нарушение кровообращения, а смертность может достигать 40%.

Диагностика ДСС особенно важна, так как пациенты могут умереть в течение 12 - 24 часов, если не проводится соответствующее лечение.

вводили.

Первичная инфекция вирусом денге характеризуется повышением уровня специфического антигена NS1 через 0 - 9 дней после начала заболевания.

Ранняя диагностика лихорадки Денге снижает риск осложнений, таких как DHF или DSS.

особенно в странах, где денге является эндемикой.

Процедура испытания

1Все реагенты должны быть оставлены на комнатной температуре в течение 15 минут перед использованием.

2Перед использованием разбавлять буфер для мытья с частотой разбавления 1:40 с дистиллированной водой.

3. Добавить 100μL разбавителя образца в соответствующую скважину, добавить 10μL образца в соответствующую скважину (не добавлять в пустую скважину). тщательно перемешать с помощью пипеты.Добавить 100μL положительной и отрицательной контрольных к скважине положительной и отрицательной контрольнойОбразец должен соответствовать количеству микропластин, каждая пластинка должна иметь 2 скважины для отрицательного контроля, 1 скважину для положительного контроля и 1 скважину для пустого контроля.

Примечание: для каждого образца, отрицательного и положительного контроля, используйте отдельный наконечник пипеты для утилизации, чтобы избежать перекрестного загрязнения.

4Осторожно встряхнуть, чтобы перемешать в течение 30 минут. Инкубировать при 37°C в течение 30 минут с мембраной уплотнительной пластины, уплотняющей пластину.

5По окончании инкубации, снимите и выбросьте крышку пластины. Вытащите, добавьте буфер для мытья в каждую скважину в течение 20 секунд. Повторите 5 раз. После последнего цикла мытьяПеревернуть тарелку на бумагу или чистый полотенце, и нажмите, чтобы удалить остатки.

6. соответственно добавление конъюгата 50μL (не добавлять в пустую скважину).

7Инкубировать при температуре 37°C в течение 30 минут, при этом мембрана уплотнительной пластины запечатывает пластину.

8Добавьте субстрат А (50μL) и субстрат В (50μL) (не добавляйте в пустую скважину).

9Добавьте 50μL Stop Solution в каждую скважину (не добавляйте в пустую скважину).Калибровка считывателя пластины с пустотой хорошо и прочитать поглощение на 450nm. Если используется инструмент с двойным фильтром, установите эталонную длину волны на 630 нм. Не допускается устанавливать пустые скважины, если для обнаружения используется двойная длина волны. Вычислить значение отсечения и оценить результаты.

• Хранить при температуре 2- 8°C.

• Поместите неиспользованные скважины в алюминиевый фоллированный мешок с цип-заблоком и верните на 2-8 °C, при которых скважины останутся стабильными в течение 2 месяцев.или до указанной даты истечения срока годности, в зависимости от того, какая из них наступит раньше.

• Запечатайте и верните неиспользованные калиброватели на 2-8 °C, при которых стабильность будет сохраняться в течение 1 месяца, для более длительного использования хранить открытые калиброватели в аликвотах и заморозить при 20 °C.Избегайте нескольких циклов заморозки и оттаивания.

• Запечатайте и верните все остальные неиспользованные реагенты на 2- 8 °C, при которых стабильность сохраняется в течение 2 месяцев или до указанной даты годности, в зависимости от того, что происходит раньше.