2. Перед использованием разбавьте промывной буфер дистиллированной водой в соотношении 1:40.
3. Добавьте 100 мкл разбавителя образца в соответствующую лунку (не добавляйте в пустую лунку, отрицательный результат).
контрольные лунки и лунки положительного контроля.) Проба должна соответствовать количеству микро
планшет, каждый планшет должен быть снабжен 2 лунками отрицательного контроля, 1 лункой положительного контроля и бланком.
контрольная 1 скважина. Добавьте 5 мкл образца в соответствующую лунку, тщательно перемешайте пипеткой, добавьте
50 мкл отрицательного контроля и положительного контроля в лунки с отрицательным контролем и лунку с положительным контролем (не
добавьте в пустое место колодец).
Примечание. Для каждого образца (отрицательного и положительного контроля) используйте отдельный наконечник пипетки.
избегать перекрестного загрязнения.
4. Аккуратно встряхивайте, чтобы перемешать в течение 30 секунд. Инкубируйте при 37°C в течение 20 минут с мембраной запечатывающего планшета.
герметизация пластины.
5. По окончании инкубации снимите и выбросьте крышку планшета. Выньте, добавьте промывочный буфер в
каждую лунку по 20 секунд. Повторите 5 раз. После заключительного цикла мытья переверните тарелку на
промокательную бумагу или чистое полотенце и постучите по нему, чтобы удалить остатки.
6. Соответственно добавление 50 мкл ферментного конъюгата (не добавляйте в пустую лунку)
7. Инкубируйте при 37°C в течение 20 минут, закрывая планшет мембраной. Повторите
шаг стирки 5 раз, как в шаге 5.
8. Добавьте 50 мкл субстрата A и 50 мкл субстрата B (не добавляйте в пустую лунку). Инкубируйте при 37 ℃ в течение
10 минут с мембраной запечатывающей пластины, герметизирующей пластину.
9. Добавьте по 50 мкл стоп-раствора в каждую лунку (не добавляйте в пустую лунку). Аккуратно перемешайте, встряхивая, прочтите
поглощение в течение 10 минут после остановки реакции. Калибровка планшет-ридера с помощью бланка
хорошо и измерьте поглощение при 450 нм. Если используется прибор с двойным фильтром, установите эталонное значение.
длина волны 630 нм. Установка пустой лунки не допускается, если для обнаружения используется двойная длина волны. Рассчитайте
Отсечное значение и оценить результаты.
Хронометрия: Считайте оптическую плотность (ОП) образца при длине волны 450 нм с помощью микропланшет-ридера.
Среднее значение ОП отрицательного контроля ≤ 0,1 и среднее значение ОП положительного контроля ≥ 0,8, тест действителен,
в противном случае тест недействителен.
Пороговое значение (CO) = среднее значение OD отрицательного контроля x 3 (рассчитывается с точностью до 0,10, когда среднее значение
Значение ОП отрицательного контроля < 0,10, рассчитанное по фактическому значению, когда среднее значение ОП отрицательного контроля
значение > 0,10)
Положительные результаты: значение OD образца ≥ CO.
Ваше сообщение должно содержать от 20 до 3000 символов!
Russian
