1Вычислить желаемое количество микроволнов.
пластиковые пакеты, которые можно запечатать, запечатать и хранить при температуре 2-8°C для последующего использования.
2Добавьте калибровщики и образцы:
2.1 Пустая скважина: не добавлять реагенты.
2. 2 Скважины калибровщиков: добавить 100 мкл калибровщиков в назначенные скважины управления.
2.3 Испытательные скважины: добавить в испытательные скважины 100 uL примерочного разбавителя, затем добавить 10 uL образца в соответствующую скважину.
2.4 В течение 20 секунд мягко встряхните пластину, а затем накройте ее уплотнителем.
3Инкубировать: инкубировать пластину при температуре 37°C в течение 30 минут.
4. Шаг стирки (может выполняться вручную или с автоматической стиркой):
Ручная стирка: аккуратно удалите инкубационную смесь, выбросив раствор в контейнер для отходов.
сбросить раствор полностью. Повторить 4.
После завершения последнего этапа мытья, нажмите на пластину на абсорбирующую бумагу, чтобы удалить остаточную жидкость.
Автоматическая стирка: автоматическая посудомоечная машина должна быть калибрована для обеспечения эффективной стирки.
Разбавьте буфер для мытья и поместите в воду в течение 20-30 секунд.
5Конъюгат: добавить 100 мкл конъюгата в каждую скважину, кроме пустой скважины.
6Инкубация: покрыть колодцы и инкубировать при температуре 37°C в течение 30 минут.
7. Шаг промывки: промыть тарелку 5 раз, как описано в шаге 4.
8. субстрат: добавить 50 мкл субстрата А и 50 мкл субстрата В в каждую скважину, включая пустую.
Инкубируйте на 37°C в темноте в течение 15 минут.
9. Стоп раствор: добавить 50 мкл стоп раствор в каждую скважину.Желтый цвет должен развиться в скважинах, содержащих положительные образцы.
10. Результаты чтения: чтение при 450/630-700 нм в течение 30 минут.
1Примечание: микропластинки также можно читать на 450 нм, но настоятельно рекомендуется читать их на 450/630-700 нм для
лучшие результаты.
Хронометрия: считайте оптическую плотность образца (OD) на 450 нм с помощью микрочитателя пластины.
Среднее значение OD отрицательной контрольной группы ≤ 0,1 и среднее значение OD положительной контрольной группы ≥ 0.8, испытание является действительным,
В противном случае тест недействителен.
Значение отсечения (C.O.) = Среднее значение OD отрицательного контроля x 3 (вычисляется на 0,10 при среднем
значение OD отрицательного контроля < 0.10, рассчитывается по фактическому значению при среднем отрицательном контроле OD
Положительные результаты: значение ОД образца ≥ CO.
Ваше сообщение должно содержать от 20 до 3000 символов!
Russian
