Только для in vitro диагностики и профессионального использования.
Наименование
Набор для иммуноферментного анализа IgG к Ct (сыворотка/плазма)
НАЗНАЧЕНИЕ
Данный набор предназначен для качественного определения IgG к Chlamydia trachomatis (Ct) в сыворотке/плазме человека. Набор
подходит для клинического скрининга и диагностики инфекции Ct в сыворотке/плазме.
ПРИНЦИП МЕТОДА
Антиген Ct адсорбируется на твердой фазе полистироловой реакционной микропланшеты. Если в исследуемом образце присутствует антитело IgG к Ct
оно связывается с антигеном Ct, нанесенным на микропланшету, образуя комплекс антиген-антитело, а затем
связывается с меченым ферментом антителом и образует комплекс антиген-антитело-антитело на поверхности
микропланшеты, и проявляет синий цвет в соответствующей лунке под действием субстрата. Таким образом, он
может специфически определять IgG к Ct в сыворотке/плазме человека.
ПРОЦЕДУРА ТЕСТИРОВАНИЯ
1. Перед использованием доведите все реагенты до комнатной температуры в течение 15 минут.
2. Перед использованием разбавьте промывочный буфер дистиллированной водой в соотношении 1:40.
3. Добавьте 100 мкл разбавителя образцов в соответствующую лунку (Не добавляйте в лунку для бланка, отрицательного
контроля и положительного контроля). Образец должен соответствовать количеству микро
планшет, каждая планшета должна содержать 2 лунки для отрицательного контроля, 1 лунку для положительного контроля и 1 лунку для бланка
контроля. Добавьте 5 мкл образца в соответствующую лунку, тщательно перемешайте пипеткой, добавьте
50 мкл отрицательного и положительного контроля в лунки для отрицательного и положительного контроля (Не
добавляйте в лунку для бланка).
Примечание: Используйте отдельный одноразовый наконечник пипетки для каждого образца, отрицательного и положительного контроля, чтобы
избежать перекрестного загрязнения.
4. Аккуратно встряхните для перемешивания в течение 30 секунд. Инкубируйте при 37°C в течение 20 минут с использованием мембраны для запечатывания планшета
запечатав планшет.
5. По окончании инкубации снимите и выбросьте крышку планшета. Извлеките, добавьте промывочный буфер в
каждую лунку на 20 секунд. Повторите 5 раз. После последнего цикла промывки переверните планшет на
фильтровальную бумагу или чистое полотенце и постучите по ней, чтобы удалить остатки.
6. Соответственно добавьте конъюгат фермента 50 мкл (Не добавляйте в лунку для бланка)
7. Инкубируйте при 37°C в течение 20 минут с использованием мембраны для запечатывания планшета, запечатав планшет. Повторите шаг промывки 5 раз, как в шаге 5.
8. Добавьте Субстрат А 50 мкл и Субстрат В 50 мкл (Не добавляйте в лунку для бланка). Инкубируйте при 37°C в течение
10 минут с использованием мембраны для запечатывания планшета, запечатав планшет.
9. Добавьте 50 мкл раствора для остановки реакции в каждую лунку (Не добавляйте в лунку для бланка). Аккуратно перемешайте, встряхивая, измерьте
оптическую плотность в течение 10 минут после остановки реакции. Калибруйте ридер планшетов с помощью лунки для бланка
и измерьте оптическую плотность при 450 нм. Если используется прибор с двойным фильтром, установите опорную
длину волны 630 нм. Не допускается использование лунки для бланка при использовании двойной длины волны для детектирования. Рассчитайте
пороговое значение и оцените результаты.
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
Хронометраж: Измерьте оптическую плотность (ОП) образца при 450 нм с помощью ридера микропланшетов.
Среднее значение ОП отрицательного контроля ≤ 0,1 и среднее значение ОП положительного контроля ≥ 0,8, тест действителен,
в противном случае тест недействителен.
Пороговое значение (C.O.) = Среднее значение ОП отрицательного контроля x 3 (Рассчитывается как 0,10, если среднее
значение ОП отрицательного контроля
< 0,10, рассчитывается по фактическому значению, если среднее значение ОП отрицательного контролязначение > 0,10)
Положительные результаты: Значение ОП образца ≥ C.O.
Ваше сообщение должно содержать от 20 до 3000 символов!
Russian
